1967年，出生在台湾省台北市的一个体育世家，从小特别喜欢打篮球。1979年，担任女子篮球队的职业前锋，打了三年篮球。1982年，在篮球场打球时，一位广告商被她的气质所吸引。随后，对方邀请王祖贤拍摄了一部化妆品的广告片。该广告片播出后，王祖贤由此产生继续学习表演艺术的愿望。初中毕业后，考入国光剧艺实验学校系统地学习表演的专业知识。

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1989年，因拍摄电影《芳草碧连天》与歌手齐秦相恋。1998年，双方在台北市购买房屋准备结婚。2003年，齐秦的前妻要求对方认养儿子，两人分手。

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香港电影金像奖 1987第7届最佳女主角倩女幽魂（提名） 锡切斯国际奇幻电影节 1992最佳女主角倩女幽魂Ⅲ：道道道（获奖）

王祖贤与张曼玉、钟楚红、关之琳并称20世纪90年代香港影坛四大名旦。她拥有清纯甜美的外貌、修长匀称的身材，非常敬业。在电影《天官赐福》里，把角色身着男装时风流潇洒而又不失红颜本色的妩媚多姿，演绎得活灵活现。在《倩女幽魂》中，凭借迷离的眼神、幽怨的气质将身世凄惨、善良多情的鬼魂刻画地入木三分。王祖贤气质冷艳，适合饰演冰火性情的女子。在电影《东方不败之风云再起》中，她的扮相给人极度的冷艳凄美之感。在《青蛇》里，她突破了传统的温文尔雅的白娘子形象，将白蛇的妖性展现十足。现实生活中的她个性直爽，很讲原则，是一位镜头感很好的艺人。